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姬姆薩染色液（Giemsa stain,1:9）

點擊次數(shù)：1367　日期：2018/8/22 15:44:52

姬姆薩染色液(Giemsa stain,1:9)
產(chǎn)品簡介：
    姬姆薩色素(又稱吉姆薩色素)是由天青Ⅱ不伊紅混合而成。Giemsa染色原理和結(jié)果不瑞氏染色基本相同，姬姆薩染色液對胞漿著色力較強，能較好的顯示胞漿的嗜堿性程度，特別是對血液和骨髓細胞中的嗜天青、嗜酸性、嗜堿性顆粒，著色清晰，但是對胞核著色偏深,核結(jié)構(gòu)顯色不佳，故姬姆薩染液常不瑞氏染液聯(lián)合使用。Giemsa Stain以進口的姬姆薩色素、甲醇為主要原料，含特有襯染劑，經(jīng)研磨配制而成，能呈現(xiàn)出清晰的細胞染色效果，經(jīng)常用于組織切片、血液和細胞涂片、細菌、染色體顯帶、原生動物寄生蟲等染色。嗜酸性顆粒為堿性蛋白質(zhì)，不酸性染料伊紅結(jié)合，染粉紅色，稱為嗜酸性物質(zhì)；細胞核蛋白和淋巴細胞胞漿為酸性，不堿性染料美藍或天青結(jié)合，染紫藍色，稱為嗜堿性物質(zhì)；中性顆粒呈等電狀態(tài)不伊紅和美藍均可結(jié)合，染淡紫色，稱為中性物質(zhì)。
      Giemsa Stain(1:9)由10×儲存液和磷酸鹽緩沖液組成，1:9混合成工作液后使用；亦可以分開使用，即先用Giemsa Stain染色，再經(jīng)磷酸鹽緩沖液處理，亦可以得到滿意的染色效果。
產(chǎn)品組成：
產(chǎn)品
100ml
500ml
Storage
試劑(A): Giemsa Stain儲存液(10×)
10ml
50ml
RT避光
試劑(B): 磷酸鹽緩沖液
100ml
500ml
RT
使用說明書
          1份                   
自備材料：
1、載玻片、顯微鏡
2、蒸餾水
3、甲醇
4、0.1～0.5%乙酸
操作步驟(僅供參考)：
（一）一步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制：
按試劑(A):試劑(B)=1:9 混合，即取1份Giemsa Stain儲存液(10×)加入到9份的磷酸鹽緩沖液中充分混勻，即為Giemsa工作液，為即用型試劑，不易保存，即用即配。
2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。
3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加Giemsa工作液覆蓋涂片，室溫滴染15～30min。
4、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。
5、干燥、鏡檢。
染色結(jié)果：
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
（二）兩步法涂片染色
1、Giemsa 工作液的配制：
按試劑(A):蒸餾水=1:4 混合，即取1份的Giemsa Stain儲存液(10×)加入到4份的蒸
餾水中充分混勻，即為Giemsa工作液。Giemsa工作液為即用型試劑，不易保存，即
用即配。
2、常規(guī)方法制備血液涂片或骨髓涂片，待涂片自然干燥后，用甲醇固定1～3min。
3、將血液涂片或骨髓涂片置于染色架上，滴加適量Giemsa工作液覆蓋涂片，室溫滴染
10～15min。
4、加入等量磷酸鹽緩沖液，輕輕晃動載玻片，室溫靜置5～10min。
5、用自來水或蒸餾水緩慢從玻片一端沖洗。
6、干燥、鏡檢。
染色結(jié)果：
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
（三）組織切片染色：
1、Giemsa  工作液的配制：
按試劑(A):試劑(B)  =1:9 混合，即取1份Giemsa Stain儲存液(10×)加入到9份磷酸鹽緩沖液中充分混勻，即為Giemsa工作液。Giemsa工作液為即用型試劑，不易保存，
即用即配。
2、新鮮組織立即置于Regaud 固定液固定2天，期間應(yīng)更換1次固定液。
3、3%重鉻酸鉀固定1天。
4、流水沖洗16個小時或過夜。
5、照常規(guī)脫水、包埋。
6、切片厚度約為5μm，常規(guī)脫蠟至水。
7、蒸餾水清洗2次，每次1min。
8、入含Giemsa工作液染缸，浸染18～24h。
9、蒸餾水稍微清洗。
10、0.1～0.5%乙酸洗1～2min。
11、自來水稍微沖洗。
12、用無水乙醇迅速脫水 3 次，每次5～10s。
13、二甲苯透明，中性樹脂封固。
染色結(jié)果：
嗜酸性顆粒
粉紅色
嗜堿性顆粒
紫藍色
中性顆粒
淡紫色
 
 
注意事項：
1、血液涂片或骨髓涂片應(yīng)厚薄均勻，以免影響染色效果。
2、涂片染色中Giemsa染色后，請勿先去除染液或直接對涂片用力沖洗。
3、如果染色過深或過淺，應(yīng)調(diào)整染色時間或工作液濃度。
4、涂片染色和組織切片染色中，pH值對染色有一定影響，載玻片應(yīng)清潔、無酸堿污染，以免影響染色效果。
5、染色液經(jīng)稀釋后液面應(yīng)金屬光澤則表示染液有染色作用，否則染色液可能失效。
6、組織切片染色中，染色后需用大量0.1～0.5%乙酸急速沖洗，避免浮面沉淀物污染切片后難以洗脫。
7、0.5%乙酸分化常用于Giemsa組織切片染色，如有必要亦可用于細胞涂片，但其濃度應(yīng)適量下調(diào)。0.5%乙酸分化切片時，切片呈粉紅色即可終止。
8、Giemsa組織切片染色中，無水乙醇脫水要迅速，否則切片易褪色。
9、涂片染色和組織切片染色中，如需急速獲得結(jié)果，可按Giemsa Stain儲存液(10×):磷酸鹽緩沖液=1:1配制Giemsa工作液，充分混勻，即為快速Giemsa染色工作液，將染色液滴加于細胞涂片或組織切片上，加熱染色，20～30s后重新加染色液，反復(fù)5～10次，其余步驟同上。
10、染色液可重復(fù)使用，但不能多次重復(fù)，若有沉淀物應(yīng)過濾后使用。
11、Regaud 固定液: 按3%重鉻酸鉀:甲醛=4:1 配制，臨用前混勻，1～2天后失效。
有效期：24個月有效。

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