高效液相色譜和古典液相色譜的比較
高效夜宵液相色譜法時(shí)1964年-1965年開(kāi)始發(fā)展起來(lái)的一項(xiàng)新穎快速的分離分析技術(shù)。它是經(jīng)典液相色譜法的基礎(chǔ)上，引入氣相色譜的理論，在技術(shù)上采用了高壓、高效固定相和高靈敏度的檢測(cè)器，使之發(fā)展成為高分離速度、高分辨率、高效率、高檢測(cè)靈敏度的液相色譜法，也稱(chēng)為現(xiàn)代液相色譜法。
古典液相色譜的致命弱點(diǎn)是柱效低、分離時(shí)間長(zhǎng)，難以解決復(fù)雜混合物的分離，與氣相色譜比較有很大的差距。從色譜的速率林論知道，要提高柱效，就要把固定相的顆粒減小，同時(shí)要加快傳遞的速率：要縮短時(shí)間就要把流動(dòng)相的速度加快。因此要客服古典液相色譜的缺點(diǎn)，就必須針對(duì)這些問(wèn)題進(jìn)行研究。采取的措施就是要研制出粒度小，傳質(zhì)縮率塊的固定相；使液相色譜柱達(dá)到柱效高、分析時(shí)間短、靈敏度高的效果。下圖為兩種方法的比較：
HPLC月GC的比較
HPLC是在GC告訴發(fā)展的情況下發(fā)展起來(lái)的。他們之間的理論上和技術(shù)上有許多共同點(diǎn)，主要有1色譜的基本理論是一致的2 定性定量原理完全一樣3均可應(yīng)用計(jì)算機(jī)控制色譜操作條件和商鋪數(shù)據(jù)的處理程序，自動(dòng)化程度較高。
由于HPLC的流動(dòng)相是液體，二液體的粘度比氣體大100倍以上，擴(kuò)散系數(shù)比氣體小，故溶質(zhì)分子與液體流動(dòng)相之間的作用力不能忽略，致使HPLC與GC有一下差別
流動(dòng)想差別：
GC用氣體做流動(dòng)相，氣體與樣子分子之間作用力可忽略，而且，載氣種類(lèi)少，性質(zhì)接近，改變載氣對(duì)柱效和分離效率影響小，HPLC以液體做流動(dòng)相，液體分子與樣品分子之間的作用力不能忽略。而且液體種類(lèi)多，性質(zhì)差別大，既可以是水溶液，又可以時(shí)有機(jī)溶劑；既可以是極性化合物，又可以時(shí)非極性化合物，可供選擇范圍廣，是控制柱效和分離效率的中藥因素之一，使HPLC除了固定相的選擇外，增加了一個(gè)可供選擇的中藥的操作參數(shù)。
固定相差別
GC固定相多事固體吸附劑和擔(dān)體表面涂漬一層高沸點(diǎn)有機(jī)液體組成的液體固定相及今年出現(xiàn)的一些化學(xué)鍵合組。GC古興祥粒度粗（一般為100-250um）、吸附等問(wèn)線(xiàn)多事非線(xiàn)性的，但成本低。HPLC固定相大都是新型的固體吸附劑，化學(xué)鍵合相等，力度小（一般為3-10um），分配等溫線(xiàn)多事線(xiàn)性的，峰形對(duì)稱(chēng)，但成本高。樣品容量比GC高，分析型色譜柱最大容量可達(dá)50mg以上。
使用范圍更廣
GC一般分析沸點(diǎn)500℃以上，相對(duì)分子質(zhì)量少于450的物質(zhì)，而對(duì)熱穩(wěn)定性差，易于分解，變質(zhì)及具有生理活性的物質(zhì)，都不能用升溫氣化的方法分析。因此GC只能分析占有機(jī)物總數(shù)15-20%的物質(zhì)
HPLC在溫室或接近室溫條件下工作，可分析沸點(diǎn)在500℃以上，相對(duì)分子質(zhì)量在450以上的有機(jī)物質(zhì)。這些有機(jī)物質(zhì)占總數(shù)的80-85%。HPLC的使用范圍遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)GC。
原理和結(jié)構(gòu)差別
高效液相色譜儀和氣象色譜儀在原理和結(jié)構(gòu)上亦有很大差別。高效液相色譜儀具有高壓輸液系統(tǒng)，其檢測(cè)器的檢測(cè)原理和機(jī)構(gòu)與GC有較大差異。
應(yīng)指出，高效液相色譜和氣相色譜各有所長(zhǎng)，互相補(bǔ)充。在HPLC越來(lái)越廣泛地獲得應(yīng)用的同時(shí)，GC仍然返回這他的重要作用。
原創(chuàng)作者：青島捷世康生物科技有限公司
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